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PSCeasy? 人多潛能干細胞消化液
PSCeasy? 人多潛能干細胞消化液可以應用于非飼養層依賴的hESC/hiPSC傳代,該工作液屬于非酶類溫和消化液,對細胞損傷小且消化時間適中便于操作,是一種已被普遍使用的消化液,可與PSCeasy?人多潛能干細胞(hESC/hiPSC)培養基搭配使用。
- 產品介紹
- 產品說明書
PSCeasy? 人多潛能干細胞消化液的傳代操作說明:
1. 將PSCeasy完全培養基取出并平衡至室溫,取出包被過Matrix的培養皿/瓶,吸去包被液并加入適量PSCeasy完全培養基,置于5% CO2的37℃恒溫細胞培養箱中。
2. 吸走待傳代細胞培養皿/瓶中的PSCeasy完全培養基,并且加入無鈣鎂的PBS溶液洗一次。
3. 加入0.5mM EDTA傳代工作液使之完全覆蓋皿/瓶底。
4. 室溫放置5 ~ 8 min或37℃恒溫細胞培養箱中孵育3 ~ 5 min,顯微鏡下觀察到大部分克隆邊緣開始脫離皿/瓶底,克隆內部大部分細胞間出現間隙但尚未相互分離,肉眼觀察到細胞集落變得不透明且發白,表明細胞消化時間理想。
5. 吸去傳代工作液,即刻加入新鮮的PSCeasy完全培養基,用移液器扇形吹打培養皿/瓶底,使皿/瓶底貼附的干細胞集落脫落,輕柔緩慢吹吸混勻。
注:吹吸的力度要輕柔,吹打脫落和吹吸混勻的次數總共不超過10次為宜。吹打過度導致大量單細胞出現是造成細胞分化或死亡的重要原因。
注:如有少量細胞無法從皿底脫落,屬于正常現象。如有大量細胞無法從皿底脫落,需延長消化時間。
6. 顯微鏡下觀察細胞呈4 ~ 20個細胞大小的團塊,水平十字搖勻。
7. 將細胞置于5% CO2的37℃恒溫培養箱培養。
8. 每天換液直至達到可以傳代的標準。
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